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加樣決定結果——ELISA實驗中的加樣常見問題與解決方案

更新時間:2025-08-05  |  點擊率:870

  加樣決定結果——ELISA實驗中的加樣常見問題與解決方案

  ELISA加樣關鍵問題與解決方案‌

  一、常見加樣問題及應對措施‌

  加樣量不準確‌

  問題表現‌:樣本或試劑體積偏差導致OD值異常‌。

  解決方案‌:

  使用校準后的移液器,定期檢查槍頭密封性‌。

  加樣時觀察液面高度,避免槍頭殘留‌。

  加樣順序混亂‌

  問題表現‌:標準品與樣本混合,數據無梯度‌。

  解決方案‌:

  按“高濃度→低濃度”加標準品,樣本按編號順序添加‌。

  設置副孔(雙平行孔)減少操作誤差‌。

  氣泡與液體濺出‌

  問題表現‌:氣泡干擾讀數,濺出導致孔間污染‌。

 

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  解決方案‌:

  垂直懸空加樣,避免貼壁或吹泡‌。

  發現氣泡時輕彈板底或針尖挑破‌。

  二、進階操作技巧‌

  溫度與試劑平衡‌

  試劑與樣本需室溫(20-25℃)平衡10分鐘,避免動力學差異‌。

  交叉污染控制‌

  每孔更換新槍頭,避免試劑瓶敞口放置‌。

  顯色終止時機‌

  最高標準品顏色穩定(或620nm吸光值平緩)時立即終止‌。

  三、數據異常處理‌

  樣本稀釋錯誤‌:重新按正確倍數稀釋后檢測‌。

  高背景信號‌:增加洗滌次數(3-5次),確保拍板力度適中‌。

  通過規范操作與細節優化,可顯著提升ELISA實驗的準確性與重復性‌。

  注:以上資料僅供參考,不同品牌產品可能存在設計差異,操作前建議參考說明書‌。

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